革兰氏染色过程

你将需要:

• 培养物或标本
• 革兰氏染色试剂
• 显微镜载玻片
• 热源(焚烧炉)
• 无菌拭子和显微镜

用蜡笔在幻灯片上做标签

• 样品数量
• 姓名或首字母缩写
• 你们班时期
• 今天的日期

使用培养盘:

• 选择一个孤立的殖民地
• 用无菌拭子轻触菌落
• 确保棉签只接触到那个菌落
• 不放下接种过的棉签

把蜂群放在滑梯上

• 拿着接种过的棉签，拿起载玻片
• 轻轻地将棉签放在载玻片上
• 用打圈的方式将细菌轻轻地涂抹在载玻片上

热固定滑梯

• 使用焚烧炉将微生物加热固定在载玻片上:
• 用木衣夹夹住幻灯片，这样你就不会被烫伤了
• 将滑梯下方置于热源处(细菌=面向你)
• 将滑梯靠在前面圈出的开口上
• 加热1分钟。这是把细菌粘附在滑梯上。

染色过程

• 将载玻片放在染色架/托盘上
• 轻轻地用水晶紫浸湿滑片
• 它会像这张图一样覆盖在幻灯片上
• 静置1分钟
• 用清水轻轻冲洗滑片

染色过程

• 轻轻地用克兰碘浸湿玻片
• 同样，幻灯片会被覆盖。
• 静置1分钟
• 用水冲洗滑片

染色过程

• 轻轻地用克氏脱色剂浸湿幻灯片
• 静置30秒
• 以清水洗净即可
• 如果冲洗时间过长，滑片会过度脱色

染色过程

• 用藏红花反染色剂轻轻浸湿载玻片
• 静置1分钟
• 用清水轻轻冲洗
• 现在是时候晾干幻灯片........

晾干和阅读幻灯片

• 用吸水纸轻轻吸干载玻片
• 将载玻片放置在显微镜台上
• 先用低功率进行
• 用粗调整确定细菌的位置
• 移动到高功率干燥(40X)，使用微调聚焦

阅读幻灯片

• 一次集中
• 移动到油浸(100X)
• 在载玻片上滴1滴浸泡油
• 用微调将细菌聚焦到视野内
• 记录你的结果:革兰阳性或革兰阴性

记录结果……记住:

• 革兰氏阳性呈紫色
• 革兰氏阴性呈红色/粉红色
• 圆形细菌
• 芽孢杆菌=杆状细菌

无标题的幻灯片